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分不清免疫細胞?CD45來幫你!
瀏覽次數(shù):17 發(fā)布時間:2025-06-10
顯微鏡下的血液樣本,宛如一場盛大的“細胞化裝舞會”。淋巴細胞、單核細胞、粒細胞……它們形態(tài)各異,功能不同,熙熙攘攘。如何在這密密麻麻的“舞池”中,快速、準確地識別出每一位“免疫衛(wèi)士”的真面目?
別擔心!當流式細胞術(shù)這位“高科技偵探”登場時,它有一位不可或缺的“關(guān)鍵裁判”——CD45! 它就像是白細胞統(tǒng)一佩戴的“專屬工作證”或“身份證”,是它們宣告“我屬于免疫大家族”的核心標志!(而紅細胞、血小板、有核紅細胞、成纖維細胞等通常“無證”或“證件模糊”,不表達或弱表達CD45)。不僅如此,CD45在T細胞、B細胞活化等關(guān)鍵免疫信號傳導(dǎo)中也扮演著重要角色,是細胞功能調(diào)控的幕后功臣之一。
CD45的核心使命:流式世界的“圈門的王”
CD45在流式細胞術(shù)中的價值,堪稱“基石中的基石”,核心就體現(xiàn)在神奇的“圈門”(Gating)技術(shù)上。這是精準分析細胞亞群的關(guān)鍵一步!
精準鎖定目標:圈出所有白細胞!
有了CD45這把“金鑰匙”,我們就能在復(fù)雜的細胞圖譜中,精準地‘圈出’所有真正的白細胞(CD45+) ! 這一步如同在茫茫人海中,給所有免疫細胞成員佩戴上醒目的熒光徽章。
層層深入,細分亞群
圈出CD45+這個大群體只是開始!緊接著,我們可以結(jié)合細胞的大小 (前向散射光 FSC) 和內(nèi)部復(fù)雜度/顆粒度 (側(cè)向散射光 SSC) 進行關(guān)鍵的第二層分選:
奠定精細分析的基礎(chǔ)
成功劃分了主要亞群的大門后,我們才能在這些門內(nèi)使用其他特異性標志物進行更精細的分析:
在淋巴細胞門內(nèi):分析 CD3 (T細胞), CD19 (B細胞), CD4/CD8 (T亞群), CD56 (NK細胞) 等。
在單核細胞門內(nèi):分析 CD14, CD16 等亞群。
沒有CD45這初道精準的“大門”,后續(xù)所有的精細分析都如同無源之水、無本之木。
用好CD45:實用技巧與避坑指南
工欲善其事,必先利其器。掌握CD45,這些要點需牢記:
抗體選擇是根本
選擇經(jīng)過充分驗證、適用于流式的抗CD45抗體。常用且可靠的克隆號包括 HI30, 2D1, 30-F11 等。
根據(jù)你的多色Panel設(shè)計,為其匹配合適的熒光染料(抗原表達水平:低表達抗原應(yīng)選擇強熒光染料,如PE、APC、BV421等;高表達抗原可選擇相對較弱的熒光染料如FITC、PE-CY5、APC-CY7等),確保其信號明亮易辨。
樣本質(zhì)量是關(guān)鍵
樣本新鮮度直接影響細胞活力和抗原表達。
處理流程至關(guān)重要:特別是裂解紅細胞是否徹底?殘留的紅細胞碎片會嚴重干擾CD45+白細胞的圈門和后續(xù)分析。死細胞過多也會影響結(jié)果。
固定、破膜等步驟(如需做胞內(nèi)染色)也需優(yōu)化,避免破壞CD45表位或增加非特異性染色。
所以,下次當你面對紛繁復(fù)雜的流式細胞圖感到眼花繚亂時,記?。?/span>先找CD45!
它不僅是白細胞的“身份證”,更是流式分析中打開免疫細胞世界大門的初把、也是最重要的一把“全能鑰匙”。精準地圈定CD45+白細胞群體,是排除干擾、獲得可靠數(shù)據(jù)的基石,也是后續(xù)一切精細分析的起點。掌握了CD45,你就掌握了流式細胞術(shù)的核心邏輯之一!
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今天小編就為大家梳理了國產(chǎn)流抗“扛把子”——GENE4Abio 所擁有的CD45靶標: